神色敷陈

1 样品信息Sample description

收到小麦样品xx个，a和b

A total of xx wheat samples, where received by the customer.

2 材料与面容Materials and Methods

2.1 试剂Chemicals

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通盘的溶剂与试剂均为色谱级，玉米素，赤霉素，水杨酸，吲哚乙酸，零散酸圭臬品购于xxx

All chemicals and solvent were HPLC. Standard: zeatin, gibberellic acid, salicylic acid, indole-3-acetic acid, abscisic acid and were purchased from xxx.

2.2 样品科罚Sample Preparation

1) 将样品摇匀，称取2.0g傍边的样品；

2) 2.0g样品加入10 mL预冷的80%甲醇，冰浴研磨成浆，保鲜膜密封后4℃下冷浸过夜；

3) 于4℃条目下8000 r/min离心10 min，取上清液；

4) 残渣加入8 mL 80%的xxx离心10 min，归拢上清液；

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5) 一起滤液于40℃下减压浓缩至原体积的1/3，加入30 mL xxx萃取销毁3次，弃醚相；

6) 水相用20 mL xxx萃取3次，归拢酯相，40℃下减压蒸干；

7) 加入2 mL xxx溶液（pH=3.5），过Sep-Pak C18小柱纯化，用甲醇洗脱，齐集后40℃下减压浓缩至干；

8) 残渣加入甲醇-xxx溶液熔解，定容至2 mL，并用0.45 µm滤膜过滤，进样10 µL。

2.3 HPLC分析HPLC Analysis

本现实所用的仪器为Agilent高效液相色谱仪，配备可变波长检测器。

色谱柱为xxx (250 mm*4.6 mm, 5 μm)，流动相A为甲醇，B为xxx溶液（pH=3.6），流速为1.0 mL/min，柱温为室温。

3 效果Results

色谱图Chromatogram

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